RNA溶解-长效保存液使用范围

RNA溶解-长效保存液使用范围

描述：RNA极易降解。纯化的RNA溶解于无RNase的TE或水中，即便是储存于−20 ºC也难免降解。为解决这一问题，可以将RNA沉淀或RNA溶液直接溶解于RNA溶解-长效保存液中，允许4 ºC 过夜或−20 ºC保存至少2年，保护样品RNA免于降解。RNA溶解-长效保存液是RNA样品运输和中长期保存的最-佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA，或直接吸取储存于RNA溶解保护液中的高浓度RNA(4 mg/ml)进行RNA电泳、Northern Blot。

储存：4ºC保存 12个月有效

用RNA溶解-长效保存液溶解RNA沉淀：
1   a) 对固体RNA沉淀而言，每0.4-4 mg RNA沉淀加入1 ml RNA溶解-长效保存液，室温振荡15-30分钟溶解沉淀。干燥的RNA沉淀难以溶解，可50 ºC加热15分钟或4ºC溶解过夜。最好先用小体积无RNase的TE或水溶解RNA沉淀，然后按液态RNA操作。
b) 对液态RNA溶液，每0.4-4 mg RNA溶液加入1 ml RNA溶解-长效保存液，混匀。注意混合液中RNA溶解-长效保存液的体积百分比不低于80%。
2. 测定OD值。注意加入相应量的RNA溶解-长效保存液做空白。
3. 将溶解的RNA样品储存于−20 ºC。

从RNA溶解-长效保存液中沉淀RNA：
1. 估计RNA溶液终体积。加入4倍体积的纯乙醇，混匀。如果溶液中RNA含量低于0.25 mg/ml，或者溶液体积过小操作不便，可先加入1/20体积的5 N NaCl混匀，然后再加入4倍体积乙醇。
2. 室温放置5分钟。
3. 12,000 rpm 5 min。弃上清。风干，溶解。
4. 重新沉淀的RNA溶解后可用于RT-PCR反应。也可用于任何其他实验。
直接使用RNA溶解-长效保存液中的RNA：
直接吸取RNA溶解-长效保存液中的RNA，进行普通或甲醛变性电泳和Northern Blot。进行甲醛变性电泳时，最后上样样品中的RNA溶解-长效保存液的浓度可高达50%。

注意：
1. 如果RNA用于逆转录RT-PCR，不推荐直接使用RNA溶解-长效保存液中的RNA，应该用乙醇沉淀RNA。
2. 在RNA溶解-长效保存液中的RNA的终浓度不应该超过4mg/ml。