细胞铁离子检测试剂盒检测原理

细胞铁离子检测试剂盒检测原理

描述：
铁是人体必需的元素之一，对人体的新陈代谢和身体健康具有重要作用，血液中铁的含量不足，就会造成缺铁性贫血。铁存在于人体所有的细胞内，各组织、器官包括各内分泌腺都含有铁。肝脏、脾脏和肺组织内含量较为丰富。成人体内含铁3～5克，大部分都以蛋白质复合物形式存在，极少部分以离子的形态存在。本试剂盒采用亚铁嗪比色法可以定量细胞铁离子，线性范围5~300uM。产品包括标准品和空白对照，本试剂盒可进行100个样品的检测。 

原理：
铁与蛋白结合成复合物，在酸性介质中铁从复合物中解离出来，再被还原剂还原成二价铁，并与亚铁嗪生成紫红色化合物，在540-580nm处可比色测定。

储存
4℃保存，6个月有效。
适用范围：
该试剂盒可用于培养细胞中铁离子定量检测。
用户自备：
4.5%高锰酸钾溶液5ml。

操作步骤：
1. 样品准备（以24孔板为例）：
将含铁元素DMEM培养过的细胞用冷的PBS 2ml洗两遍，将PBS吸弃（若不马上检测可将其冻存于-20℃）。200ul/孔裂解液裂解细胞，置于摇床裂解2h。
2. 标准品的稀释：用试剂盒提供的稀释用液将3mM 的标准品母液稀释为：300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀释并设置0浓度对照反应管。
3. 将缓冲液与4.5%高锰酸钾溶液按1:1混匀，称为混液A。