Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料

Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料

Hoechst 33342它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低，常被称为DNA探针。实验研究中Hoechst 33342常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测，也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。活细胞和固定的细胞均可标记。Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低，常被称为DNA探针。实验研究中Hoechst 33342常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测，也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。活细胞和固定的细胞均可标记。

产品参数

别名：HOE 33342；bisBenzimide；二苯甲亚胺, 三氯化氢 2-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌-嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑

CAS：23491-52-3

分子式：C27H28N6O·3HCl

分子量：561.93 

性状：暗黄色粉末

溶解性：溶于水（20mg/mL）

使用方法

配制储存液

用无菌超纯水配制成1-5 mg/ml的储存液于4℃避光保存。使用时用PBS或者其他合适缓冲液将其稀释成0.5-10μg/ml工作液。

A：固定的细胞或组织染色

对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33342染色。或者直接进行后续的Hoechst 33342染色。

a）对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可。

b）对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

c）吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

d）直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm，发射波长460 nm。

B：活细胞或组织染色

1) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液，充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。     

2) 在 37℃培养细胞 10～20 分钟。

3) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

4) 封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。