D-荧光素钾盐是萤火虫荧光素酶底物

D-荧光素钾盐是萤火虫荧光素酶底物

D-荧光素（ D-Luciferin）是萤火虫荧光素酶底物，其量子效率为 0.88，是鲁米诺（Luminol）的 20 倍。D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶 （Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在 ATP 和荧光素酶的作用下，荧光素（底 物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞 后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物 的治疗功效等。也可以利用 ATP 对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。D-荧光素也常用于体外研究，包括 荧光素酶和 ATP 水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。 

使用方法

1. 活体成像分析方法 

A：用 DPBS（w/o Mg2+、Ca2+）配置 D-Luciferin 工作液（15mg/mL），0.2 μm 滤膜 无菌过滤。立即使用，或 分装-20℃保存。 

B：注射量：10μL/g 的体重，如 10g 重小鼠，注射 100μL 工作液（1.5mg D-Luciferin）。 

C：腹腔注射 10～15 分钟后，上机进行图像分析。

 *建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力曲线，从而确定高信号检测时间和信号平台期。

2. 体外分析方法 A：用无菌水配置 200×的 D-Luciferin 储备液（30mg/mL），立即使用，或分装-20℃保存。 

B：用预热好的*培养基稀释 D-Luciferin 储备液，配置工作液（150μg/mL）。 

C：去除培养细胞的培养基。 

D：进行图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育 5-10 min，进行图像分析。