双链DNA中和缓冲液是怎么配的

双链DNA中和缓冲液是怎么配的

产品名称：双链DNA中和缓冲液

规格：100ml/500ml

保存：室温

有效期：12个月

用途：又称为中性转移缓冲液,仅用于双链DNA的杂交

说明：由Tris-HCl、氯化钠组成，Ph7.4。

DNA 的双链是一个完整的基因纽带，在每个细胞核里都有一套，控制成长规律。（除了红血细胞之类的的细胞没有 DNA）单链仅仅在细胞复制时才会有。细胞复制的过程中，纽带将被打开，由复制体从蛋白材料中取材，复制成单链 DNA 的另一半。从而产生新的细胞核。大部分DNA以双螺旋结构存在，但一经热或碱处理就会变为单链状态。单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、碱基反应性质等方面都和双链DNA不同。某些噬菌体粒子内含有单链环状的DNA，这样的噬菌体DNA在细胞内增殖时则形成双链DNA。

使用缓冲液时应注意的一些事项

1.向缓冲液中添加一些必要的稳定剂(如巯基保护剂——乙醇、多元醇、甘油、蔗糖、乙二醇、DDT等),以保护生物大分子重要的活性基团或空间结构。

2.添加金属离子或络合剂,以保护对金属离子敏感(需要或不需要)的生物大分子。有些酶需要两价的金属离子(如Ca++,Mg++,Mn++等)作为其辅因子;有些生物大分子则要时刻防范上述酶类(如DNase,Nuclease等)对它们的降解,故要向缓冲液中添加EDTA或EGTA 等螯合剂,以保护它们不被降解。

3.添加蛋白酶抑制剂。如我们要研究蛋白质分子,在分离纯化他们的过程中,必须时刻防止他们被蛋白酶所水解。为此可向缓冲液中添加PMSF或DFP(磷酸二异丙基氟),亮抑肽等。它们可分别抑制哺乳动物蛋白酶或丝氨酸蛋白酶的活力。

4.蛋白质添加剂:生物大分子需要有一定的浓度,才能保持其完整的空间构像。因此,经过一系列分离纯化步骤而终得到纯酶制品时,有时其浓度很低。为保持这类浓度很稀的纯酶的活力,往往要向这类酶制品(特别是一些商售的限制性核酸内切酶)中人为地添加一些蛋白质,如牛血清白蛋白(BSA)或酪蛋白(Casein)等,从而既保护了目的酶的空间构象又不影响其活力。

5.渗投压:在组织和细胞的体外培养、保存或洗涤等实验中,除了溶液的酸碱度,营养成分和与其它离子或化学成分的相互作用外,还要注意液体的渗投压。低渗可导致溶血或细胞膜破裂,高渗引起细胞皱缩或抑制细胞代谢。有的缓冲对浓度稍高,即可因其与其它离子或化学成分相互作用而影响溶液的稳定性或对细胞的功能产生副作用,因此,为了不使某一缓冲对的浓度过高,可以在同一个溶液中添加多个不同的缓冲系统;为了保持溶液处于等渗状态,避免高渗或低渗的出现,常通过添加氯化钠等中性盐的方法调整溶液的渗投压。