双链DNA 变性缓冲液尤其适用于Southern blot 实验

双链DNA 变性缓冲液尤其适用于Southern blot 实验

双链DNA 变性缓冲液又称为中性转移缓冲液，由1.5M NaCl 、微量NaOH 等组成，不含蔗糖，可用于核酸杂交等，尤其适用于Southern blot 实验。本试剂仅用于科研领域，不宜用于诊断或其他用途。

规格：100ml/500ml

保存：室温

有效期：12个月

用途：又称为中性转移缓冲液,常用于杂交

说明：由氯化钠、碱水组成。

使用缓冲液时应注意的一些事项

1.向缓冲液中添加一些必要的稳定剂(如巯基保护剂——乙醇、多元醇、甘油、蔗糖、乙二醇、DDT等),以保护生物大分子重要的活性基团或空间结构。

2.添加金属离子或络合剂,以保护对金属离子敏感(需要或不需要)的生物大分子。有些酶需要两价的金属离子(如Ca++,Mg++,Mn++等)作为其辅因子;有些生物大分子则要时刻防范上述酶类(如DNase,Nuclease等)对它们的降解,故要向缓冲液中添加EDTA或EGTA 等螯合剂,以保护它们不被降解。

3.添加蛋白酶抑制剂。如我们要研究蛋白质分子,在分离纯化他们的过程中,必须时刻防止他们被蛋白酶所水解。为此可向缓冲液中添加PMSF或DFP(磷酸二异丙基氟),亮抑肽等。它们可分别抑制哺乳动物蛋白酶或丝氨酸蛋白酶的活力。

4.蛋白质添加剂:生物大分子需要有一定的浓度,才能保持其完整的空间构像。因此,经过一系列分离纯化步骤而终得到纯酶制品时,有时其浓度很低。为保持这类浓度很稀的纯酶的活力,往往要向这类酶制品(特别是一些商售的限制性核酸内切酶)中人为地添加一些蛋白质,如牛血清白蛋白(BSA)或酪蛋白(Casein)等,从而既保护了目的酶的空间构象又不影响其活力。