植物中脂氧合酶测定原理！

植物中脂氧合酶测定原理！

九游AG信誉生物专业提供植物中脂氧合酶（LOX），产品质量稳定，*，确保销售给客户的产品是能够符合质量标准,适合客户要求的产品。本产品*，欢迎新老客户前来咨询订购.

测定意义：

LOX广泛存在于植物组织中，催化不饱和脂肪酸氧化反应，导致膜脂过氧化。在植物的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。

测定原理：

LOX催化亚油酸氧化，氧化产物在234nm处有特征吸收峰；测定234nm吸光度增加速率，来计算LOX活性。

自备仪器和用品：

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入2mL试剂二，充分溶解。

粗酶液提取：

称取约0.1g样品，加试剂一1mL，冰上充分研磨，16000g 4℃离心20min，取上清液待测。

测定：

1. 分光光度计预热30 min以上，调节波长到234 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二在25℃水浴中预热30 min以上。

3. 空白管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL蒸馏水、160μL试剂二和20μL试剂三，迅速混匀后于234nm比色，记录15s和75s的吸光值，分别记为A1和A2。

4. 测定管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL上清液、160μL试剂二和20μL试剂三，迅速混匀后于234nm比色，记录15s和75s的吸光值，分别记为A3和A4。

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