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WB实验代测,Western Blot技术服务

发布时间: 2019-03-18  点击次数: 1689次

WB实验代测,Western Blot技术服务


产品简介:

免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Westernblotting),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。


凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA 结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术zui初用于研究DNA 结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA 序列的相互作用。



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WB实验代测,Western Blot技术服务

成功完成Western Blot检测,必须满足4个条件:

 


凝胶洗脱:转移期间蛋白质必须从凝胶中洗脱出来,如果蛋白质还截留在凝胶中,将无法在膜上进行分析

 


吸附到膜上:在转移过程中蛋白质必须吸附到膜上,如果蛋白不吸附,将无法在膜上进行分析处理期间仍截留在膜上:在转移后的处理过程中蛋白质必须保持吸附在印迹膜上

 


处理过程中可接近:被吸附的蛋白质必须能够与检测试剂接触,如果蛋白质被掩盖则无法检测成功进行WB检测,则设置合适正确的对照是*的,只要正确设置了这些对照,即可快速和准确的找到WB的问题所在,并保证实验结果的准确性和特异性!


一般需要设置的对照如下:

 

阳性对照:明确表达检测蛋白的组织或细胞,用于检测抗体的工作效率

 

阴性对照:明确不表达检测蛋白组织或细胞,用于检测抗体的特异性

 

二抗对照:不加一抗,用于检测二抗的特异性

 

内参对照:检测标本的质量和二抗系统

 

空白对照:不加一抗和二抗;用于检测膜的性质和封闭的效果 


WB实验代测,Western Blot技术服务

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