组织甘油检测生化试剂盒

组织甘油检测生化试剂盒介绍：

甘油三酯是由甘油和脂肪酸酯化而成，是血脂的主要成分，也是机体重要的供能物质。高甘油三酯是常见的高脂血症，与许多疾病相关。与血浆甘油三酯测定相比，实体组织和细胞的甘油三酯测定并非易事。本试剂盒避免了有毒的仿甲醇提取、繁杂的氮气吹干和脂质复溶等步骤，采用高效能试剂进行组织细胞裂解和甘油三酯抽提，而且优化了GPO Trinder酶学反应组分和操作步骤。简单易行、灵敏度高检测范围为20-2000µmol/L。可用于精确测量动植物组织细胞、固态食品材料、高浓度油料样品中的甘油三酯含量。

原理：

（1）脂肪酶分解血清中的甘油三酯为甘油；

（2）甘油激酶将甘油磷酸化为3-磷酸甘油；

（3）3-磷酸甘油被甘油磷酸氧化酶氧化产生过氧化氢；在过氧化物酶作用下生色底物转化为苯醌亚胺，其光密度值与甘油浓度成正比。

适用范围：适用于动物实体组织、培养细胞、油料植物组织、固态食品组织、高浓度油料样品中甘油三酯含量的测定。

操作步骤：

组织细胞裂解：

在裂解前，组织或者细胞用PBS洗涤两次以去除甘油。

1. 原代脂肪细胞：200g，5分钟离心收集细胞。建议每100µl压积（Packed Cell Volume）脂肪细胞加入1ml裂解液，震荡裂解，而后室温静置10分钟。

2. 分化脂肪细胞或非脂肪细胞：可先用酶消化、离心收集细胞而后进行裂解，也可直接在培养皿内进行裂解。通常情况下，可按比例每1x106个细胞加入0.1ml裂解液，混匀后室温静置10分钟。

3. 动物组织：离心管精确称重，加入组织块后再称重，二者相减(即减量称重法)计算组织重量(约50mg)。强烈建议按比例每1mg组织加20µl裂解液以减少样品间蛋白和脂质含量变异而产生的误差。强烈建议裂解液用量在1ml左右，保证有效的匀浆裂解与脂质提取。用电动高速匀浆器或手动玻璃匀浆器破碎组织。（不超声方法，因其不能和均匀破碎。应根据预实验调整初始的组织细胞加入量），匀浆后静置10分钟。

4. 植物油料种子、食品、含高油量样品：用减量称重法对样品进行精确称重，建议按比例每1mg组织加20µl裂解液以减少样品间蛋白和脂质含量变异而产生的误差。加入裂解液后可用研钵对样品进行研磨，而后将研磨液转移到新的离心管中，室温静置10分钟。

组织甘油检测生化试剂盒所有产品仅供科研使用，不得用于食用，医疗等其它用途。