九游AG信誉生物供应：DNA拓扑异构酶I

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DNA 拓扑异构酶I

产品描述：

本制品是将TopA基因(E.coli)在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离而得到的。完整的DNA 拓扑异构酶I（DNA Topoisomerase I）全酶是一分子量97kDa的蛋白。

DNA 拓扑异构酶I催化4种反应：

1. 催化负超螺旋DNA的松弛。

2. 在单链环状DNA分子内形成绳结（Knotting）和解开绳结（Unknotting）。

3. 催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。

4. 2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时，发生两个分子的连结反应（Catenation）或者逆反应（Decatenation）。

九游AG信誉生物供应：DNA拓扑异构酶I

产品用途：

1. 催化负超螺旋松弛

2. 识别错配

3. DNA的结构转换和解析

4. 其他科研用途

保存温度：

-20℃

产品包装：

质量保证：

经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：

一个单位定义为在25μl反应体系，37℃15分钟条件下，能催化>95% 的0.5 μg pUC19 RF I型 (负超螺旋)DNA的解旋所需要的酶量。DNA超螺旋化通过不含EB的琼脂糖凝胶电泳来检测。

反应条件：

1x反应缓冲液[50mM KAc,20mM Tris-Ac,10mM Mg(Ac)2,100ug/ml BSA(pH7.9储存于25℃)]，37℃温育。

热失活：

65℃，20分钟。

注意事项：

pUC19 RF I型DNA用DNA拓扑异构酶I处理后进行琼脂糖凝胶电泳时，如果胶中含有EB染料，反应前后DNA条带位置不发生改变。这是由经过DNA 拓扑异构酶I的作用转换为松弛型的DNA受EB影响，再次变为超螺旋状态造成的。因此使用DNA 拓扑异构酶I作用后，先用不含EB染料的胶行电泳，再用EB染色。

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