ELISA实验操作前的准备

ELISA实验操作前的准备

　　1、样本要求：样本应清澈透明，悬浮物应离心去除;避免使用溶血、高血脂样本。样本收集后若不立即检测，冻存于-80°冰箱，避免反复冻融。样本每次检测使用前要混匀，用完后将相应版布局及样本编号记录在实验本上，样本及时放入冰箱。

　　2、实验前准备

　　1.对应订单找到相应的样本和试剂盒。

　　2.核对样本个数、种类、编号、样本量是否足够，核对试剂盒种属、个数、日期，确定试剂盒是否够用、有没有过期。

　　3.注意订单上备注栏客户的要求，是否做复孔等。(以上三点有问题在实验前及时与销售沟通)

　　注：安排好时间，注意实验节奏，做好相应的记录帮助记忆，安排要有条理。

　　3、操作要求

　　1.试剂盒在使用前要平衡到室温，底物在使用前应保存在暗处，避光;

　　2.正式实验前需做预实验确定合适的稀释倍数，做预实验前注意说明书上建议稀释倍数。预实验双抗夹心法选取标曲最高两个点，竞争法选取标曲高点与低点，选取两个样本根据建议稀释倍数稀释三个梯度;

　　3.孵育温度与时间准确;洗板非常重要，每步洗板都一定要洗干净;

　　4.标准品在用前稀释，且稀释的每一步都要混匀，注意标曲的起始浓度是否与重溶浓度一致;

　　5.点样量一定要精确，打尽移液枪内样本与试剂，快速、等量的将试剂分配到各个微孔中;

　　6.抗体和HRP稀释倍数要严格按照说明书规定稀释;

　　7.各步骤之间，需用封板贴密封反应板避免蒸发;实验一旦开始，应连续完成所有的实验步骤，切勿中断。

 ELISA实验操作前的准备