T4 DNA聚合酶使用详情

 T4 DNA聚合酶使用详情

T4 DNA Polymerase在模板以及引物存在的条件下，沿5’-3’方向催化合成DNA，T4 DNA Polymerase具有3'→5'外切酶活性，但不具有5'→3'外切酶活性。运输和储存方法。

聚合酶（polymerase）又称多聚酶。是专门生物催化合成脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的一类酶的统称。

可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶；(2)依赖RNA的DNA聚合酶；(3)依赖DNA的RNA聚合酶；(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶，它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ，PolⅡ和PolⅢ等)；DNA聚合酶只能在有引物的基础上，即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸，这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外，还需要Mg2+ 、模板DNA和引物，迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。

干冰运输。

-20℃保存。有效期一年。

应用

T4 DNA Polymerase可用于催化以下反应：DNA 5'或3'突出末端的平滑化

通过置换反应进行标记DNA探针合成

定点突变过程中第二链的合成

不依赖于连接反应的PCR产物克隆

单位定义

37℃、30分钟内催化10 nmol脱氧核糖核苷酸（dNTPs）掺入到多聚核苷酸中所需要的酶量，定义为1个活性单位 (U)。