土壤DNA提取试剂盒使用技巧

土壤DNA提取试剂盒使用技巧

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适用于各类土壤样品中核酸的提取。样本预处理采用陶瓷珠和二氧化硅颗粒混合而成的玻璃珠，可有效处理真细菌孢子和内生孢子，革兰氏阳性细菌，酵母，藻类，线虫和真菌等土壤中的各类微生物。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司*新型材料，配合本公司*的裂解液配方可以可在40 min内大限度的回收高纯度核酸。提取的DNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种下游应用实验，如酶切、PCR等实验。

运输与保存方法
室温运输，室温保存，有效期 12 个月。

注意事项
1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途！
实验前准备
1. 自备设备和试剂：台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴，无水乙醇，离心管等。
2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用可以达到 12,000 rpm 转速的传统台式离心机

DNA 提取：
1. 将 DNA 吸附柱套入 2 mL 收集管中，备用。
2. 将预处理混合液加入到 DNA 吸附柱中，12,000 rpm 室温离心 1 min，弃掉废液。
【注】：混合液每次大加入体积 700 μL，可分多次离心。
【注】：离心后，若滤膜仍有液体残留，可延长离心时间至 5 min。
3. 将 DNA 吸附柱放回收集管，加入 600 µL 漂洗液 W*，12,000 rpm 室温离心 30 sec，弃废液。
【注】：确保漂洗液 W*已添加无水乙醇。
4. 重复一遍步骤 3。
5. 将 DNA 吸附柱放回收集管，空柱 12,000 rpm 室温离心 2 min，以除去残留的漂洗液 W*。
6. 将 DNA 吸附柱放入新的洁净 1.5 mL 离心管中，在滤膜中央加入 30-100 µL 洗脱液，室温放置 3 min。然后 12,000 rpm 离
心 1 min，收集滤液即为样本 DNA。
【注】：可通过以下方式提高回收产量：①65℃预热洗脱液；②将滤液再次上柱，室温放置 3 min，洗脱。
7. 样品 DNA 可置于-20℃短期保存，-80℃保存。
【注】：过量的 DNA 可能抑制下游 PCR 反应，遇到这种情况建议将 DNA 模板进行稀释后试用。