土壤DNA提取试剂盒使用技巧
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适用于各类土壤样品中核酸的提取。样本预处理采用陶瓷珠和二氧化硅颗粒混合而成的玻璃珠,可有效处理真细菌孢子和内生孢子,革兰氏阳性细菌,酵母,藻类,线虫和真菌等土壤中的各类微生物。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司*新型材料,配合本公司*的裂解液配方可以可在40 min内大限度的回收高纯度核酸。提取的DNA纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种下游应用实验,如酶切、PCR等实验。
运输与保存方法
室温运输,室温保存,有效期 12 个月。
注意事项
1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途!
实验前准备
1. 自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,无水乙醇,离心管等。
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用可以达到 12,000 rpm 转速的传统台式离心机
DNA 提取:
1. 将 DNA 吸附柱套入 2 mL 收集管中,备用。
2. 将预处理混合液加入到 DNA 吸附柱中,12,000 rpm 室温离心 1 min,弃掉废液。
【注】:混合液每次大加入体积 700 μL,可分多次离心。
【注】:离心后,若滤膜仍有液体残留,可延长离心时间至 5 min。
3. 将 DNA 吸附柱放回收集管,加入 600 µL 漂洗液 W*,12,000 rpm 室温离心 30 sec,弃废液。
【注】:确保漂洗液 W*已添加无水乙醇。
4. 重复一遍步骤 3。
5. 将 DNA 吸附柱放回收集管,空柱 12,000 rpm 室温离心 2 min,以除去残留的漂洗液 W*。
6. 将 DNA 吸附柱放入新的洁净 1.5 mL 离心管中,在滤膜中央加入 30-100 µL 洗脱液,室温放置 3 min。然后 12,000 rpm 离
心 1 min,收集滤液即为样本 DNA。
【注】:可通过以下方式提高回收产量:①65℃预热洗脱液;②将滤液再次上柱,室温放置 3 min,洗脱。
7. 样品 DNA 可置于-20℃短期保存,-80℃保存。
【注】:过量的 DNA 可能抑制下游 PCR 反应,遇到这种情况建议将 DNA 模板进行稀释后试用。