琥珀酸脱氢酶(SDH)检测试剂盒使用贴士

产品说明：

SDH（EC 1.3.5.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶，位于线粒体

内膜上的一种膜结合酶，是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外，为多种原核细胞产能的呼吸链提

供电子。

SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸，脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸（PMS）传递还原2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），

并且在600nm处具有特征吸收峰，通过600nm吸光度的变化，测定2,6-DCPIP的还原速度，代表SDH酶活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者

增加样本量进行检测。

 

 

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

SDH 活性的计算

（1） 按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟消耗1nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
SDH活性（U prot）=[（ΔA测定-ΔA空白）÷（ε×d）×V反总×10
9]÷(Cpr×V样) ÷T
=1555.556×（ΔA测定-ΔA空白）÷Cpr
（2） 按样本质量计算
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟消耗1nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
SDH活性（U/g 质量）=[（ΔA测定-ΔA空白）÷（ε×d）×V反总×10
9]÷(V样÷V样总×W) ÷T
=1571.111×（ΔA测定-ΔA空白）÷W
（3） 按细菌或细胞数量计算
单位的定义：每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟消耗1nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
SDH活性（U/10
4 cell）=[（ΔA测定-ΔA空白）÷(ε×d)×V反总×10
9]÷(V样÷V样总×500) ÷T
=3.142×（ΔA测定-ΔA空白）
V反总：反应体系总体积，0.98×10
-3L；ε：2,6-二氯吲哚酚摩尔消光系数，21×10
3L/mol/cm；d：比色皿光径，
1cm；V样：加入样本体积，0.03mL；V样总：加入试剂一和试剂二体积，1.01mL；T：反应时间，1min；Cpr：样
本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万；10
9：单位换算系数，1mol=109nmol。