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丙烯葡聚糖凝胶S系列现货供应

发布时间: 2021-09-01  点击次数: 449次
丙烯葡聚糖凝胶S系列现货供应
 
 
丙烯葡聚糖凝胶系列填料是烯丙基葡聚糖和N,N'-亚甲基双丙烯酰胺的交联共聚物,平均粒径为50μm,同时增加了基体的刚性,确保快速流动特性和高分辨率。
1 理化指标
测条件:层析柱16mm×600mm *柱床高60cm,25℃,流动相为0.1mol/LNaCl。
2 贮存
产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20%乙醇)通风、干燥、清洁的地方,不能冷冻。用过的柱子贮存在4℃(20%乙醇),保质期:2年。
3 操作步骤
3.1 装柱
(1)让所有的材料和试剂均平衡至层析实验的温度。配制缓冲液,对所有的缓冲液进行脱气处理。
(2)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。
(3)根据需要量取相应量的凝胶,用去离子水清洗掉20%乙醇。
(4)将柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位,务必使底端无气泡。
(5)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
(6)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填料大耐压)。
3.2 平衡
上样前平衡层析柱至少5-10个柱体积,直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的pH值和电导值等于上柱Buffer的pH值和电导值)。
3.3 上样
(1)样品用平衡液配制,样品一定要离心或过滤后上样(0.45um滤膜),如果样品盐浓度太大,则需要处理后再上样。
(2)的上样量不超过柱体积的5%。
3.4 洗脱
用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。
3.5 再生
一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。在一些应用中,诸如变性蛋白质或脂质体物质在再生过程中洗脱不掉。出现下面这些情况,是必须需要清洗再生的:
(1)背压增加;
(2)色谱柱顶部的颜色变化;
(3)分辨率降低;
(4)转换接头和凝胶表面之间出现空隙。
如果观察到压力增大,在开始柱清洁程序之前先检查管路中的各个过滤阀、过滤膜是否被污染,然后通过用0.1M NaOH洗涤柱子,除去沉淀的蛋白质,非特异性结合的蛋白质和脂蛋白。
4 注意事项
(1)上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的正常使用。所有的缓冲液均需要用0.45um的过滤器过滤。
    (2)在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于0.1摩尔。碱会使流速变慢。
    (3)不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。

 

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