酪氨酸酶活性检测试剂盒多种仪器都可以操作哦
产品说明:
酪氨酸酶(tyrosinase:EC1.14.18.1)是一种单酚单加氧酶,是具有双功能的含铜糖蛋白,广泛
存在于植物、酵母和动物组织中。酪氨酸酶是生物体合成黑色素的关键酶,也是引起果蔬酶促褐变
的主要因素,同时也对昆虫的免疫及生长有重要影响酪氨酸酶催化L-多巴生成多巴色素,其在475nm下有特征吸收峰,进而测定出酪氨酸酶的活性。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研
钵/匀浆器、冰、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理:
(1)组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。12000g,4℃离心20min,取上清,置
冰上待测。
(2)细胞或微生物样品的制备:先收集细胞或微生物样品到离心管内,弃上清,按照每500万细胞
或微生物加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)。12000g,
4℃离心20min,取上清,置冰上待测。
(3)血清(浆):直接检测。
三、酪氨酸酶活力计算:
1、 按微量玻璃比色皿计算:
(1) 按蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化生成1nmol多巴色素的酶量定义为一个酶活性单位。
酪氨酸酶(U prot)=∆A÷(ε×d)×V反总×109÷(V样×Cpr)÷T =90.09×∆A÷Cpr。
(2) 按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟催化生成1nmol多巴色素的酶量定义为一个酶活性单位。
酪氨酸酶(U/g 鲜重)=∆A÷(ε×d)×V反总×109÷(W÷V提取×V样)÷T =90.09×∆A÷W
九游AG信誉生物对质量的控制涵盖生物试剂、放行、市场质量反馈的全过程,包括原辅料、包装材料、工艺用水、中间过程及成品的质量标准和分析方法的建立、取样、检验和产品稳定性考察和市场不良反馈样品的复核等工作,确保产品的稳定性。我们确保销售给客户的产品是能够符合质量标准,适合客户要求的产品。
注意事项: 1、当分光光度计∆A大于0.3或酶标仪∆A大于0.2时,建议将样品用提取液稀释后测量;∆A过小时,建议增加酶促反应时间(5min或10min)或增加加入的样品体积来测定。 2、试剂一溶解后易氧化。溶解后尽快用完。