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FITC标记牛血清白蛋白标定方法

发布时间: 2020-10-29  点击次数: 752次

FITC标记牛血清白蛋白标定方法


牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一种球蛋白,包含607个氨基酸残基,分子量为66.446KDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用。


牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。仅含己糖和己糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 Da,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为Blocking agent。

 

标记材料:

1、异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)异构体I(isomer I),来源于sigma,MW:389.4,激发波长 493nm,发射波长 550nm。

2、牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin ,BSA),进口分装,MW: ~68000,纯度98%。

3、标记缓冲液:0.5M pH9.5 CB(碳酸盐缓冲液),洗脱液:0.01M pH7.2 PBS。

标记方法:

直接标记法:RT 2.5-3.0hs,离心后过Sephadex G-50,0.01M pH7.2 PBS洗柱。

质量分析:

溶液为0.01M pH7.2 PBS(含0.03%proclin,50%甘油),蛋白浓度为5mg/ml左右,FITC浓度为30-45ug/ml,含有防腐剂。

FITC标记牛血清白蛋白进口分装,现货供应

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