抗血清注射途径可根据不同抗原及试验要求,选用皮内、皮下、肌肉、静脉或淋巴结内等不同途径注入抗原进行免疫。一般常采用背部、足掌·耳后等处皮内或皮下多点注射。初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2~4周。常规免疫方案为抗原加CFA皮下多点注射进行基础免疫;再以免疫原加IFA作2~5次加强免疫,每次间隔2~3周,皮下或腹腔注射加强免疫。
1)常规(皮内多点注射)免疫:
1一次免疫:剂量为每只兔子注射1.0 ml抗原乳剂(含抗原量1~2mg)。注射部位为两只后脚掌的皮内各注射0.2 ml,其余0.6 ml分多点注入脊柱二侧,颈部,腹股沟和腋窝等处淋巴结附近部位皮内,每点可注入0.05ml,分12点注入。
2第二次免疫:初次免疫后20天左右,剂量为1.0ml/只(1~2 mg/ml),加福氏不*佐剂。注射部位在腹部皮下多点注射,每点注入0.1 ml。
3第三次免疫:再次免疫后两周内进行,注射剂量和部位同第二次免疫,免疫后7~14d抽取少许静脉血,分离血清,试血测定效价。
2)淋巴结免疫:主要优点是可减少用量。过程如下:
1卡价苗致敏:免疫前足掌皮下每侧各注入活卡价苗(75 mg/ml)0.3 ml。10天左右观察两侧腘窝淋巴结,一般可肿胀如蚕豆大小,此时即可进行淋巴结内免疫注射。
2一次免疫:用手淋巴结后在两侧腘窝淋巴结内各注入抗原乳剂0.25ml,每只兔总量0.5 ml;为加强免疫,于初次免疫20天后,于腹部皮下多点注射不加佐剂抗原溶液1mg/1ml。
3二周后可如同一次免疫的剂量和途径再注射一次,一般可在第三次免疫注射前试血滴定效价,效价如已达到要求可不必进行第三次免疫。
有条件的情况下,免疫后要加强动物饲料管理,如给熟黄豆饲养等。
3)腹腔免疫:一般不必加佐剂,适用于细胞性或颗粒性抗原,而且抗原性较强者,例如用绵羊红细胞免疫家兔或小鼠即可用此法。