尿素氮检测试剂盒测定原理

尿素氮检测试剂盒测定原理

尿素氮是人体蛋白质代谢的主要终末产物。氨基酸脱氨基产生NH3和CO2，两者在肝脏中合成尿素，每克蛋白质代谢产生尿素0.3g。尿素中氮含量为28/60，几乎达一半。通常肾脏为排泄尿素的主要器官，尿素从肾小球滤过后在各段小管均可重吸收，但肾小管内尿流速越快重吸收越少，也即达到了最大清除率。和血肌酐一样，在肾功能损害早期，血尿素氮可在正常范围。当肾小球滤过率下降到正常的50%以下时，血尿素氮的浓度才迅速升高。正常情况下，血尿素氮与肌酐之比(BUN/Scr)值约为10.1，高蛋白饮食、高分解代谢状态、缺水、肾缺血、血容量不足及某些急性肾小球肾炎，均可使比值增高，甚至可达20～30；而低蛋白饮食，肝疾病常使比值降低，此时可称为低氮质血症。

在加热和强酸条件下，尿素氮与二乙酰肟缩合成红色的联吖嗪称之Fearon 反应。根据色泽的深浅可以计算出尿素氮的含量。 

标本：
草酸盐、肝素或EDTA 抗凝的血浆。血浆中的尿素氮在室温下可稳定24 小时，而在4～6℃至少稳定7 天。尿液用生理盐水作1:10～1:50 稀释后与血浆操作相同。若超出线性范围，须再稀释。

注意事项：
1、酸溶液与肟溶液可按等量混匀，用量为2mL，但此混合液只能保存7 天左右。
2、比色前若发现沉淀，则可3500 转/分离心10 分钟。
3、颜色太深时，将样品作适当稀释，结果再乘以稀释倍数。
4、重度脂血标本要用除蛋白滤液测定。
5、试剂4℃保存，有效期一年。
6、本法可以在反应完后从反应液中吸取适量（200-300μL），加入到96 孔板中（注意不要引入气泡），酶标仪520nm下读数，吸光值代入公式计算。