噻唑兰(MTT)也称作溴化噻唑蓝四氮唑
噻唑兰(MTT),也称作溴化噻唑蓝四氮唑,是一种黄色染料,常用来检测细胞的活力、细胞增殖、以及细胞毒性分析。检测原理:MTT是一种可接受氢离子的化合物染料,带正电荷,具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的深蓝色MTT-甲臜结晶,而死细胞不具有此功能。甲臜结晶是不能穿透细胞膜,因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。甲臜结晶可用DMSO或者酸化的异丙醇溶解出来,酶标仪下测定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量与活细胞数目成正比,用以评估细胞存活状况。
分子式:C18H16BrN5S 分子量:414.32
简介:MTT是一种生物染料。常用于基于MTT检测方法的细胞活力、细胞增殖或细胞毒性检测。因为MTT具有正电荷,它可以穿过细胞膜并被线粒体还原形成紫色甲臜染料。溶解MTT甲臜染料需要使用有机溶剂。脱氢酶的检测,染色法。
别名:噻唑蓝(MTT);3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide, MTT, Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide
物理性状及指标:
外观:……………………黄色或橙色固体
纯度:……………………≥98%
溶解性:…………………5mg/ml溶于水、盐溶液、培养基;溶于甲醇、DMSO,乙醇(20 mg/ml)
熔点: ………………………195℃。
干燥失重: …………………<1.0%
储存条件:2-8°C,避光防潮密闭干燥
运输条件:常温运输
使用方法
1:接种细胞:用含10%胎牛血清的培养基配制单个细胞悬液,以每孔1000-10000个细胞量接种到96孔板,每孔体积200ul。
2: 培养细胞:正常培养及加药等处理细胞。
3:呈色:培养及处理完毕后,PBS清洗每孔细胞后,每孔加MTT溶液20ul(5mg/ml用PBS配制,pH=7.4),继续培养箱孵育4 h。
4: 终止培养:小心吸弃孔内培养上清液,对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO,振荡10min,使结晶物充分融解。
5:比色:490nm酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录结果,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
用途及描述:科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体。MTT产生淡黄色溶液,通过活细胞的线粒体脱氢酶转化为深蓝色甲瓒。用酸化的异丙醇溶解蓝色晶体,并在570nm处比色测量强度。
1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;
2.细胞增殖及细胞活性测定。