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你了解什么是 β-半乳糖苷酶吗!

发布时间: 2021-09-02  点击次数: 2260次

你了解什么是 β-半乳糖苷酶吗!

β-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.23)属于糖苷水解酶,存在多种微生物来源,除了水解活性,某些来源的 β-半乳糖苷酶也具有转糖基活性。来源不同的酶具有不同的特性,例如酶的适 pH,适温度,动力学常数Km会有所区别。此外,酶的来源不同,如克鲁维酵母、曲霉、芽孢杆菌、链球菌和隐球菌属和不同的反应条件,如温度和 pH,酶反应合成低聚半乳糖的聚合度、产率及形成糖苷键的类型也不同。

性质:

β-半乳糖苷酶由β-半乳糖苷酶基因(LacZ 基因) 编码,是由4 个亚基组成的四聚体,一般可催化乳糖分解为一分子的葡萄糖和一分子的半乳糖。从不同物种提取的β-半乳糖苷酶的蛋白质序列有着较高的同源性和相似性。β-半乳糖苷酶的分子质量在100~850 ku 之间,其中大肠杆菌的β-半乳糖苷酶分子质量zui大,为520~850 ku。已有多种来源的β-半乳糖苷酶基因被克隆。

来源:

β-半乳糖苷酶的主要来源有:① 细菌、霉菌、酵母等微生物,其中细菌中的乳酸菌、大肠杆菌等,霉菌中的米曲霉、黑曲霉等,酵母中的脆壁克鲁维酵母、乳酸克鲁维酵母等,放线菌中的天蓝色链霉菌等;② 植物,尤其是杏、扁桃和苹果等;③ 哺乳动物,特别是幼小哺乳动物的小肠中。仅来源于微生物的β-半乳糖苷酶有工业应用价值,商业用酶源一般认为酵母(如乳酸克鲁维酵母、脆壁克鲁维酵母) 为安全,其次为黑曲霉。

不同来源的β-半乳糖苷酶适pH 在4.0~7.5之间不等。适pH 不同决定了来源不同的β-半乳糖苷酶各自的用途不同,如霉菌所产生的β-半乳糖苷酶的适pH 偏酸性(pH 2.5~5.0),适用于酸性乳清和干酪的水解(含大量乳糖);而酵母和细菌所产生的β-半乳糖苷酶的适pH 近中性(分别为pH 6~7 和pH 6.5~7.5),适于牛乳(pH 6.6)和鲜乳清(pH 6.1)的水解。β-半乳糖苷酶的适作用温度范围较宽,在37~50 ℃之间。酵母β-半乳糖苷酶的适作用温度在35 ℃左右;而霉菌的适作用温度一般在50 ℃以上,高可达60 ℃;环状芽抱杆菌可达65 ℃;嗜热水生菌则为80 ℃。耐高温微生物菌株使用时可避免杂菌污染,所以细菌尤其是嗜热细菌所产生的β-半乳糖苷酶正得到广泛的研究。迄今,大肠杆菌产生的β-半乳糖苷酶研究得*,并已大量应用于生化分析

用途:

用于生化研究。β-半乳糖苷酶能够水解通过 β-1→4糖苷键连接在单糖、寡糖或糖肽上的半乳糖残基。它主要用于酶联免疫检测中,偶联在抗体上作为标记物。此外,β-半乳糖苷酶还可用于糖类结构分析、乳糖检测和钠离子检测


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