冻干粉标准菌株传代和复壮

冻干粉标准菌株传代和复壮 

【冷冻管开封】 用浸过 75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。

【菌株复溶】无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取 1ml 左右复溶液，加入到冷冻管中。轻轻振荡，使冻干菌 株溶解呈悬浮状。

【菌株复壮】用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。做好标识，在适宜温度下培养。细菌在 30-35℃培养 箱中培养 24-48h，真菌在 20-25℃培养箱中培养 24-72h（必要时，可适当延长培养时间）。

【菌株传代】将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中（尽量增大接种量：如用无菌吸 管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓慢释放），适宜温度下培养，用以菌株的保藏、传 代及制备工作菌株。

【注意事项】

1、 菌种活化前，将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中，长时间室温下放置会导致菌种衰退；

2、 冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行；

3、 一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，部分需连续两次继代培养才能正常生长；

4、 苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时来电询问；

5、 某些厌氧菌的培养，自开封到接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态；培养过程中亦要保 持厌氧状态；

6、 某些菌种，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要 5-10%CO2促进生长；

7、 如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况，应停止使用对应产品。

8、 部分菌种有致病性、扩散性，请专业人员在专业环境下有保护性操作。