中性蛋白酶也称为分散酶，作用迅速有效又温和

中性蛋白酶也称为分散酶，作用迅速有效又温和

Dispase中文名称为中性蛋白酶，也称为分散酶，是一种非特异性的金属蛋白酶，被用来从各种不同组织或器官中消化细胞外基质，释放并制备原代单细胞；或用于细胞培养中的细胞收获或接种转移；也被用于防止悬浮细胞培养时的细胞意外结团。

蛋白水解酶类，如胰蛋白酶、胶原酶和链酶蛋白酶都被用语来分散组织、分类细胞，但他们常伤害细胞，并且在培养时不稳定，甚至可能引入支原体污染。Dispase就没有这个问题，不会给细胞膜带来伤害，而且因为其来自细菌，故不会引入支原体或任何动物病毒；温度、pH、血清成分等的差异对Dispase影响很小。Dispase经稀释后其活性就大大降低，这也方便了后续的培养。Dispase甚至被加入细胞培养悬液中用于防止细胞团结。

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优势：

该酶已被证实作用迅速有效又温和；

细胞能保持完整，细胞膜无损；

该酶非哺乳动物来源，不含支原体或动物病毒污染；

对于温度、pH的改变、以及血清成分都很稳定；

使用螯合剂或稀释就能简单灭活；

酶活定义：

1U是在检测条件下1分释放相当于1 umol酪氨酸的Folin阳性氨基酸或肽的酶量；DispaseII：≥0.8 U (37℃，使用酪蛋白作为底物，pH 7.5)；1U Dispase II基本相当于600U日本单位的Dispase。

抑制剂： EDTA、EGTA、Hg2+、其他重金属。血清不会抑制酶活性。

使用方法：

用Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)溶解Dispase至10 mg/ml，使用时用细胞培养液稀释到0.6-2.4 U/ml。不高于2.4 U/ml的 工作浓度，可用0.22 um的无菌滤膜过滤除菌。

保存方法：

保存在2-8℃；配成溶液后，在2-8℃ 2周内使用有效，在-20°2个月内使用有效；不要反复冻融；储存液用Hepes盐缓冲液稀释后，2-8℃，3天内使用有效。