超氧阴离子试剂盒提取方法

超氧阴离子试剂盒提取方法


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测定意义：

生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。

测定原理：

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO₂^－，NO₂^－在对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用下，生成红色的偶氮化合物，在530nm处有特征吸收峰，根据A₅₃₀值可以计算样品中O₂^－含量。

自备实验用品及仪器：

天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、lv仿和蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体8mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂三：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂四：lv仿，自备。

超氧阴离子提取

1. 植物、动物组织：称取约0.1g样本，加入提取液1mL，充分研磨，12000rpm，4℃，离心20min，取20μL上清测定蛋白含量，其余上清作为待测样本。

2. 血清或培养液：直接测定。



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