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抗血清的制备方法
1、动物的选择
羊、马、鸡、猴、豚鼠,都是常用的免疫动物,在实验中,选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮.为雄性。常用的实验动物是家兔,一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性,体重2 ~3公斤,健康家兔三只,免疫前用金属编号牌固定兔耳,或用染料涂沫在动物的背部,作出明确的标记。
2、抗原制备
1)抗原稀释:用灭菌生理盐水将抗原稀释为2mg/ml,于免疫前一天加入溶液,使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI,链霉素1000 UI,放4℃过夜(一般可不加青、链霉素)次日取出,与佐剂混合制成乳剂后用于动物免疫。
免疫原的注射剂量应考虑其抗原性的强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。对于纯的可溶性抗原的免疫剂量,通常小鼠抗原剂量为50~100μg/次,大鼠为100~200μg/次,兔为100μg ~1 mg/次,合成免疫原为2 mg(半抗原约为20~200μg),一般需要与等量的福氏*佐剂混合。加强免疫的剂量为计量的1/2,通常用不*福氏佐剂或不用佐剂。如需制备高度特异性的抗血清,可选用低剂量抗原短程免疫法;反之,欲获得价的抗血清,宜采用大剂量抗原长程免疫法。