孕酮（PROG）放免试剂盒实验过程中应该注意哪些！

孕酮(PROG)放免试剂盒实验过程中应该注意哪些！

孕酮是由卵巢黄体分泌的一种天然孕激素，在体内对雌激素激发过的子宫内膜有显著形态学影响，为维持妊shen所必需。黄ti酮用于先兆性LIU产、习惯性LIU产等闭经或闭经原因的反应性诊断等。

[使用目的]
用于定量测定人血清（或血浆）中孕酮（PROG）的浓度。

[用途]
孕酮是一种含 21 碳原子的重要雌性激素，主要由卵巢，肾上腺和妊shen时胎盘产生。孕酮在血液循环中代谢很快,半衰期为 5 分钟,产物为孕二醇,孕二醇在肝脏内与葡萄糖醛酸结合成水溶性的葡萄糖醛酸孕二醇,经肾脏排出，其生理作用是保证受精卵着床和维持妊shen。上孕酮的测定主要用于确定排卵，孕激素治疗监测和早期妊shen状态的评价以及在判断黄体功能状态方面等具有重要意义。本品采用了第二抗体＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理：含孕酮（PROG）的样品和 125I 标记的孕酮衍生物与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及PEG，使免疫复合物沉淀，离心，测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中孕酮（PROG）的浓度。

[实验方法]
A B C D E F G （单 位）
0 0.3 1.1 3.5 10 20 80 ng/mL
1、 将实验所需试剂及样本放置室温，平衡至少 30 分钟以上才可进行操作；
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复；
3、 取每个浓度的标准品、质控血清和样本 100µl 加入相应编号的试管中；
4、 每管均各加入 200µl 标记物工作液；
5、 每管均各加入 200µl 抗体工作液，充分混匀；
6、 37℃温育 1.0 小时；
7、 每管均各加入 1000µl 分离剂后，充分混匀；
8、 室温放置 5~10 分钟后，离心 3500 转／分，20 分钟后，吸去或倾倒掉上清液；
9、 用 γ-计数器测定各管计数CPM. 检测时间: 1 分钟
10、 从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。

[实验过程中应注意]
1、 γ-计数器本底计数应≤100CPM/分，效率应≥75％；
2、 加入放射性标记物时，应做好防护、小心谨慎，以避免造成放射性污染；
3、 如果某一个样本的测定值高于zui高浓度的标准品浓度，用零标准品以 1：2 或 1：
4 的比例稀释样本后重新测试，测试结果乘以相应的稀释倍数。

孕酮(PROG)放免试剂盒实验过程中应该注意哪些！