单宁含量检测试剂盒操作原理是什么！

单宁含量检测试剂盒操作原理是什么！

简介：

单宁是葡萄酒中所含有的两种酚类化合物其中的一种物质，尤其在红葡萄酒中含量较多，有益于心脏血管疾病的预防。葡萄酒中的单宁一般是由葡萄籽、皮及梗浸泡发酵而来，或者是因为存于橡木桶内而萃取橡木内的单宁而来。单宁的多少可以决定酒的风味、结构与质地。缺乏单宁的红酒质地轻薄，没有厚实的感觉，薄若莱红酒就是典型代表。单宁丰富的红酒可以存放经年，并且逐渐酝酿出香醇细致的陈年风味。当葡萄酒入口后口腔感觉干涩，口腔黏膜会有褶皱感，那便是单宁在起作用。

产品说明：
单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物，又称植物多酚。具有*的化学性质和多种生理活性，如能与蛋白质、生物碱、多糖结合；能与多种金属离子发生络合或静电作用；具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。单宁在碱性环境下与磷钼酸反应，生成蓝色化合物，在760nm 处有大吸收峰。

检测原理：

测定原理：单宁在碱性环境下与磷钼酸反应，生成蓝色化合物，在760nm 处有大吸收峰。

需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

操作步骤：
一、 单宁的提取：
按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL蒸
馏水），充分匀浆后转移到EP 管中，80℃水浴提取30min，8000 g，25℃离心10 min，取上清液待
测。

二、 测定步骤：
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至760nm，蒸馏水调零；试剂一和试剂二37℃预热10min
以上。

混匀，室温静置30min，760nm 处读取吸光值A，ΔA=A 测定-A 对照，对照管只要做一管。

三、 单宁含量计算：

1、 标准条件下测定的回归方程为y = 0.008x - 0.0021；x 为标准品浓度（μg/mL），y 为吸光值。

2、 按样本鲜重计算：
单宁含量（μg /g 鲜重）= [(ΔA＋0.0021) ÷0.008×V1]÷（W×V1÷V2）=125×(ΔA＋0.0021) ÷W。

3、 按样本蛋白浓度计算：
单宁含量(μg /mg prot)= [(ΔA＋0.0021) ÷0.008×V1]÷(V1×Cpr)=125×(ΔA＋0.0021) ÷Cpr。
V1：加入样本体积，0.015mL；V2：加入提取液体积，1mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本鲜重，g。

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