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小鼠抗双链DNA抗体ELISA试剂盒新一代产品正确的选择!

发布时间: 2018-05-14  点击次数: 1947次

小鼠抗双链DNA抗体ELISA试剂盒新一代产品正确的选择!

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。

检测目的
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中抗双链DNA抗体(dsDNA) 含量。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠抗双链DNA抗体(dsDNA) 水平。用纯化的小鼠抗双链DNA抗体(dsDNA) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入抗双链DNA抗体(dsDNA) ,再与HRP标记的抗双链DNA抗体(dsDNA) 抗 体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗双链DNA抗体(dsDNA) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标 准曲线计算样品中小鼠抗双链DNA抗体(dsDNA) 浓度。

ELISA试剂盒实验操作事项:
1、要确保微量加样器的准确性,可以使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质,温度环境为20℃左右时,1ml的水可以看作是1g,200ul的水可以看作是0.2g),每一把微量加样器都应该将其zui高量程和zui低量程进行确定。
2、在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。
3、吸取液体时速度不且太快,以免产生气泡,吸取的量不够准确。
4、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头的液体和孔壁接触,液体会自然流下去。吸入液体时的zuihao方法是吸两档打一档,防止由于枪头的毛细作使得部分液体不能流出而造成误差。

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5、吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。
6、液体全部加入酶标孔后,zuihao将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s,使液体充分混合均匀,也使其得到充分的反应。

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