九游AG信誉生物答疑：明胶酶谱试剂盒在操作时候的注意事项

九游AG信誉生物告知您：明胶酶谱试剂盒在操作时候的注意事项！

本公司销售基质金属蛋白酶MMP2/MMP9明胶酶谱试剂盒，很多老师在使用的时候出不来条带，九游AG信誉生物为您答疑解惑：

做不出来的原因：

1.样本失活

2.电泳操作不对

3.孵育时间不够

九游AG信誉生物告知您：明胶酶谱试剂盒在操作时候的注意事项！

注意事项：

1.制备聚丙烯酰胺时应注意排除气泡。

2.明胶酶谱的活性受钙离子，锌离子，和PH值等因素的影响，因此缓冲液配制应严格准确，尽量用超纯水，孵育温度也掌握好。

3.用大梳子

4.孵育液的PH在7.5-7.6，复性的TRITON时间长了会有絮状物，所以实验时尽量使用新鲜配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培养箱中，因为会改变孵育液的PH值，在普通孵箱即可。

6.细胞样本用PBS 5倍体积震荡裂解,估算细胞的体积，然后加入5倍体积的PBS，涡旋振荡15-30s,而后静置或低速离心.或者手动震荡。

7.组织或者细胞的话可以用PBS，也可以用低渗溶液如三分之一或者四分之一的生理盐水按照5倍体积加入后震荡裂解细胞，离心即可，步骤和提蛋白很相似即可,其实重点的步骤主要是采用低渗裂解液进行裂解，组织的话可以匀浆20-30次，然后10000转左右离心，5分钟取上清即可。

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