人白细胞介素35elisa试剂盒检测中的技术支持

人白细胞介素35(IL-35)elisa试剂盒简介

白细胞介素即是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。[1]

目前至少发现了38个白细胞介素[2]  ，分别命名为IL-1~IL38，功能复杂，成网络，复杂重叠[3]  ；在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用，此外它们还参与机体的多种生理及病理反应。[1]

免疫系统细胞的增殖、分化和功能受到一系列细胞因子的调节。根据细胞因子的结构同源性可将其分为几个蛋白质家族，如IL-1家族、IL-6家族、IL-10家族、肿瘤坏死因子家族和造血因子家族等。白细胞介素穿插归类为其中。

IL-38

结构：白细胞介素(interleukin, IL)-38是zui近发现的IL-1家族细胞因子的第10个成员。IL-38的特异性受体为IL-36R，它是IL-36的部分受体拮抗剂。

功能：IL-38可抑制Th17细胞产生IL-17和IL-22等炎症介质，也可抑制IL-36γ诱导产生IL-8，从而抑制炎症反应。

人白细胞介素35(IL-35)elisa试剂盒检测中的

间接法

　　1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；

　　2.次日洗涤3次；

　　3.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；

　　4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；

　　5.37℃孵育30-60分钟，洗涤；

　　6.zui后一遍用DDW洗涤。

    7.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

　　8.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　9.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

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