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大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)elisa试剂盒的检测技术

发布时间: 2017-05-09  点击次数: 1168次

大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)elisa试剂盒基本信息简介

乙酰胆碱酯酶简称AchE,具有羧肽酶和氨肽酶的活性。乙酰胆碱酯酶参与细胞的发育和成熟,能促进神经元发育和神经再生。Chubbe等的研究证明,AchE具有羧肽酶和氨肽酶的活性。在体外,AchE能水解脑啡肽(Enk)和P物质(SP),但不能水解生长抑素(Som)和血管加压素(VSP)等。进一步的研究证明,AchE作为肽酶,其水解肽的活性部位和作为酯酶的活性部位不同。值得注意的是,神经系统许多非胆碱能的,含大量AchE的神经元同时亦含有各种神经肽类物质。如脊髓背根节的SP能细胞即是AchE强阳性。zui近的研究显示,高度纯化的来自电鳗电器官或牛血清的AchE具有蛋白酶样或外切酶的活生。对于血清蛋白质,AchE能发挥C端残基的清除作用。此外,AchE的蛋白酶样作用还得到分子生物学证据的支持,氨基酸分析显示,AchE蛋白质分子与蛋白酶样内切酶以及血清羧肽酶的氨基酸序列相似。在它们的C端36个残基范围内,有40%氨基酸序列和蛋白酶的活性片段相同。

大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)elisa试剂盒检测技术简介

间接法

  1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;

  2.次日洗涤3次;

  3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;

  4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;

  5.37℃孵育30-60分钟,洗涤;

6.’zui后一遍用DDW洗涤。

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